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小麥醇溶蛋白(Gliadin)ELISA試劑盒實驗使用說明書
發(fā)布時間:2025/4/9瀏覽:605次
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  小麥醇溶蛋白ELISA試劑盒是用于檢測植物組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中小麥醇溶蛋白含量的重要工具。使用前,需將試劑盒從冷藏環(huán)境中取出,室溫平衡15-30分鐘。實驗時,采用雙抗體夾心法,將純化的小麥醇溶蛋白抗體包被微孔板,加入樣本及HRP標(biāo)記的檢測抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。經(jīng)過洗滌后,加底物TMB顯色,顏色深淺與樣品中小麥醇溶蛋白含量正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中小麥醇溶蛋白濃度。注意,實驗過程需避免交叉污染,嚴(yán)格按照說明書操作,且不同批號組分不得混用。試劑盒保存于2-8℃,有效期6個月。

  BS-5040  小麥醇溶蛋白(Gliadin)ELISA試劑盒  天津本生

  以下是小麥醇溶蛋白(Gliadin)ELISA試劑盒的實驗使用說明書:

  一、實驗原理

  采用雙抗體夾心法:用純化的Gliadin抗體包被微孔板,依次加入樣本/標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物。TMB顯色后在450nm波長下測定OD值,顏色深淺與Gliadin濃度呈正相關(guān)?。

  二、試劑盒組成

  組分 96孔配置 48孔配置

  酶標(biāo)板 12孔×8條 12孔×4條

  標(biāo)準(zhǔn)品(16μg/mL) 0.5mL×1瓶 0.5mL×1瓶

  酶標(biāo)試劑 6mL 3mL

  顯色劑A/B 各6mL 各3mL

  終止液 6mL 3mL

  30×洗滌液 20mL 15mL ?

  三、樣本處理要求

  血清/血漿?:采集后1000×g離心10-30分鐘,避免溶血?

  細(xì)胞上清?:1000×g離心10分鐘去除顆粒?

  組織勻漿?:用生理鹽水勻漿后離心取上清?

  保存?:-20℃短期保存,-70℃長期保存,避免反復(fù)凍融?

  四、操作步驟

  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液進(jìn)行梯度稀釋(建議濃度:0、0.2、1、4、9μg/mL)?

  加樣?:

  空白孔:不加樣

  標(biāo)準(zhǔn)孔:50μL標(biāo)準(zhǔn)品

  樣本孔:40μL稀釋液+10μL樣本(5倍稀釋)?

  溫育?:37℃孵育30分鐘?

  洗滌?:用稀釋后的洗滌液洗板5次,每次靜置30秒?

  顯色?:每孔加顯色劑A/B各50μL,37℃避光反應(yīng)10分鐘?

  終止?:每孔加50μL終止液?

  檢測?:450nm波長讀取OD值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計算濃度?

  五、注意事項

  安全防護(hù)?:避免接觸終止液/顯色劑,操作時穿戴防護(hù)裝備?

  試劑保存?:

  未開封試劑盒2-8℃保存

  開封后酶標(biāo)板需密封防潮?

  質(zhì)量控制?:

  標(biāo)準(zhǔn)品復(fù)孔CV應(yīng)<15%

  樣本OD值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)?

  六、技術(shù)參數(shù)

  檢測范圍?:0.2-9μg/mL(96T)?

  靈敏度?:<0.1μg/mL?

  有效期?:6個月(2-8℃保存)?

  (注:不同品牌試劑盒可能存在細(xì)微差異,請以實際產(chǎn)品說明書為準(zhǔn))

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