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大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)
發(fā)布時(shí)間:2025/3/18瀏覽:627次
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  大鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)如下:

  1. 試劑盒組成

  ?酶標(biāo)包被板?:1×48或1×96孔,2-8℃保存?。

  ?標(biāo)準(zhǔn)品?:濃度為2700ng/L,0.5ml×1瓶,2-8℃保存?。

  ?標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液?:1.5ml×1瓶?。

  ?酶標(biāo)試劑?:3ml×1瓶(48孔配置)或6ml×1瓶(96孔配置)?。

  ?顯色劑A液和B液?:各3ml×1瓶(48孔配置)或6ml×1瓶(96孔配置)?。

  ?樣品稀釋液?:3ml×1瓶(48孔配置)或6ml×1瓶(96孔配置)?。

  ?封板膜?:2片?。

  ?說(shuō)明書(shū)?:1份?。

  2. 實(shí)驗(yàn)步驟

  ?試劑準(zhǔn)備?:將試劑盒從冰箱中取出,室溫平衡20-30分鐘?。

  ?標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制?:以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線?。

  ?樣品處理?:血清、血漿、組織勻漿等樣品需離心去除沉淀,分裝后冷凍保存,避免反復(fù)凍融?。

  ?加樣?:依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,溫育并洗滌?。

  ?顯色?:加入底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化為黃色?。

  ?讀數(shù)?:使用酶標(biāo)儀讀取OD值,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品濃度?。

  3. 注意事項(xiàng)

  ?實(shí)驗(yàn)誤差控制?:建議所有標(biāo)準(zhǔn)品、樣本和空白對(duì)照做雙份檢測(cè),取平均值?。

  ?顯色控制?:若顯色過(guò)淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)底物溫育時(shí)間?。

  ?樣品保存?:樣品宜在新鮮時(shí)檢測(cè),避免細(xì)菌污染?。

  ?試劑保存?:開(kāi)封后未用完的酶標(biāo)包被板應(yīng)立即裝入密封袋中加干燥劑保存?。

  4. 實(shí)驗(yàn)器材

  ?標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀?:用于讀取OD值?。

  ?自動(dòng)洗板機(jī)?:用于洗滌微孔板?。

  ?37℃恒溫箱?:用于溫育反應(yīng)?。

  ?移液器及吸頭?:建議使用多通道移液器以提高效率?。

  ?洗滌液?:使用中性PBS或TBS?。

  以上內(nèi)容綜合了多個(gè)來(lái)源的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明,確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性?。

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