性色欲网站人妻丰满中文久久不卡,国产精品一亚洲av日韩av欧 ,精品国产免费一区二区三区,亚洲国产精品日韩AV专区

服務(wù)熱線:
15502280048
技術(shù)支持

您現(xiàn)在的位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章  >  怎樣做有效減少ELISA實(shí)驗(yàn)中背景因素的影響

怎樣做有效減少ELISA實(shí)驗(yàn)中背景因素的影響
更新時(shí)間:2023-06-29瀏覽:684次

  怎樣做有效減少ELISA實(shí)驗(yàn)中背景因素的影響


  在ELISA試劑盒操作中,我們都認(rèn)為ELISA實(shí)驗(yàn)的原理似乎很簡(jiǎn)單,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,間中夾雜著洗滌和封閉。然而,即使是平淡無(wú)奇的洗滌和封閉,如果做得不太好,也有可能毀了整個(gè)實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí),我們是否能獲得有意義的信息,這在很大程度上取決于結(jié)果的信噪比。背景噪音會(huì)影響您對(duì)結(jié)果的判斷。如何降低ELISA的背景,下面是BUNSEN本生小編的一些詳解。

  ELISA原理:

  一、洗滌很重要

  洗滌步驟看似很無(wú)聊,其實(shí)很重要,因?yàn)槿绻唇Y(jié)合的材料(如非特異結(jié)合的抗體或檢測(cè)試劑)殘留在微孔板中,那么它會(huì)增加背景噪音。如有必要,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會(huì)阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過(guò)高,而您懷疑洗滌不夠時(shí),可以嘗試增加洗滌次數(shù)。

  二、封閉更關(guān)鍵

  封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這就降低了可產(chǎn)生信號(hào)的抗體非特異結(jié)合的機(jī)會(huì)。您當(dāng)然也希望抗體只與目的蛋白結(jié)合吧。如果您的背景過(guò)高,懷疑封閉不充分,那么您可以嘗試使用更高濃度的封閉液,或適當(dāng)延長(zhǎng)封閉時(shí)間。

  如果您一直被背景問(wèn)題所困擾,那么也許您該花些時(shí)間來(lái)優(yōu)化封閉液。這可能需要時(shí)間,但也是值得的。目前主要有兩種類型的封閉液:蛋白和非離子型去污劑。您使用的類型須取決于多個(gè)因素,包括微孔板的表面試劑、吸附的抗原、您的抗體和檢測(cè)試劑。好的封閉液應(yīng)降低非特異性結(jié)合,但它不應(yīng)當(dāng)與抗原、抗體或檢測(cè)試劑發(fā)生相互作用。

  ELISA試劑盒常用的非離子型去污劑是Tween-20。這種封閉液便宜、穩(wěn)定,在去除洗滌過(guò)程中的一些非特異結(jié)合上很有用。但它們只在存在時(shí)起作用,因?yàn)楹苋菀妆幌吹?。因此所有洗滌液中也必須添加封閉液。請(qǐng)勿使用高濃度(正常濃度為0.01-0.1%),它會(huì)降低特異結(jié)合,產(chǎn)生假陰性。另一個(gè)選擇是使用蛋白和非離子型去污劑這兩種封閉液,后者可協(xié)助洗滌過(guò)程中的封閉。

  蛋白封閉液則有所不同,是*的。它們與開(kāi)放位點(diǎn)結(jié)合并封閉,同時(shí)穩(wěn)定與微孔板結(jié)合的抗原分子。常用的蛋白封閉液包括牛血清白蛋白(BSA)、脫脂奶粉、正常血清和魚明膠。血清組分的內(nèi)在多樣性可使它有效攔截許多不同類型的分子相互作用。不過(guò),它的缺點(diǎn)在于能與Protein A和IgG抗體相互作用。解決這個(gè)問(wèn)題的一種方法是使用雞或魚的正常血清。

  三、抗體濃度須優(yōu)化

  我們通常會(huì)follow師兄師姐留下來(lái)的操作步驟,但是如果試劑稍有不同,則可能需要優(yōu)化抗體的量。記住,非特異的抗體結(jié)合會(huì)增加背景。為了防止這一點(diǎn),切勿使用過(guò)多的一抗或二抗。

  四、ELISA試劑盒檢測(cè)試劑要適量

  另一點(diǎn)也很顯而易見(jiàn):切勿使用過(guò)多的檢測(cè)試劑。如果濃度過(guò)高,或者未正確稀釋,則會(huì)導(dǎo)致高背景。也不要顯色過(guò)度,如有必要,優(yōu)化一下何時(shí)應(yīng)加入終止液。

  如果您的ELISA試劑盒操作中不幸地遇到了高背景,那么也無(wú)需太擔(dān)心,依次查看ELISA系統(tǒng)中的組分,并排除可能存在的問(wèn)題。悉心優(yōu)化,相信很快就會(huì)有漂亮的結(jié)果。

  elisa試劑盒本生一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命,追求企業(yè)競(jìng)爭(zhēng)力的不斷提升。公司在經(jīng)營(yíng)中始終秉承:遵紀(jì)守法,嚴(yán)于律己,寬仁以待,敢于承擔(dān)的企業(yè)精神作為標(biāo)準(zhǔn),以過(guò)硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來(lái)維護(hù)和拓展市場(chǎng),較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏,是我們的發(fā)展目標(biāo)。本生!您信任的合作伙伴。我們?cè)概c您真誠(chéng)合作,共創(chuàng)美好的未來(lái)。


本生(天津)健康科技有限公司 版權(quán)所有    備案號(hào):津ICP備19006588號(hào)-1

技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    管理登陸    網(wǎng)站地圖

聯(lián)系電話:
18502669006

微信服務(wù)號(hào)

少妇极品熟妇人妻高清性色av| 五十款夜间禁用app粉色视频 | 精品香蕉一区二区三区| 特级做a爰片毛片免费看| 国产香蕉一区二区三区在线视频| a片在线观看免费| 亚洲国产综合久久久精品| 又湿又紧又大又爽又A视频| 一本一道色欲综合网中文字幕| 亚洲色无码a片一区二区潘甜甜| 色av色婷婷66人妻久久久| 成人无码一区二区三区| 成人免费区一区二区三区| 中文字幕乱妇无码av在线| 韩国19禁无遮挡啪啪无码网站| 性欧美丰满熟妇xxxx性| 小苹果电影完整版在线观看| 婷婷五月综合色视频| 亚洲精品乱码久久久久久v| 花蝴蝶免费直播视频在线观看 | 久久精品国产99国产精品亚洲| 伊人久久精品无码二区麻豆| 国产suv精品一区二区| 日韩在线观看高清视频| 丰满白嫩人妻中出无码| 精品人妻伦九区久久aaa片69| 亚洲精品尤物av在线观看不卡| 成人性生交大片免费看| yellow免费高清在线观看 | 片多多免费观看高清电影| 亚洲色无码a片一区二区情欲| 欧美乱人伦人妻中文字幕| 久久久久亚洲AV成人网人人| 精品淑女少妇AV久久免费 | 人妻丰满熟妇av无码区hd| 精品露脸国产偷人在视频| 欧美牲交a欧美牲交aⅴ一| 久久99精品久久久久久| 强开小嫩苞第一次免费视频| 免费无码成人AV电影在线播放| 日韩电影一区二区三区|