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本生闡述:影響ELISA試劑盒試驗(yàn)成果的要素
更新時間:2023-05-25瀏覽:731次

  本生闡述:影響ELISA試劑盒試驗(yàn)成果的要素


  ELISA試劑盒,即酶聯(lián)免疫法。ELISA法具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好的特點(diǎn),并具有操作簡潔、無放射性危害的優(yōu)點(diǎn),因此多年來廣泛應(yīng)用于各高校、醫(yī)院、血站和科研機(jī)構(gòu)的試驗(yàn)室中。

  影響ELISA試驗(yàn)的要素有如下三方面:

  一、試劑盒

  1、抗原、抗體活性對效價(jià)的影響:主要是試劑中抗體(或抗原)的效價(jià)下降或失活,成果不易判別。再有ELISA試劑盒靈敏度高,對雜質(zhì)的反響靈敏度也高,試驗(yàn)中空白對照OD值偏高或假陽性;

  2、酶結(jié)合物濃度過高,也會導(dǎo)致OD值假性增高。


試劑盒1.jpg


  二、試驗(yàn)儀器

  1、加樣器是否通過校正,酶免測定血清用血量很少,如手工加樣器的功能不好,吸取樣品不,會使成果忽高忽低;

  2、每次洗板前,應(yīng)查看洗板機(jī)針孔有無阻塞。

  三、ELISA試劑盒操作

  1、檢測前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后運(yùn)用,試劑用完及時放回冰箱冷藏,避免形成試驗(yàn)成果假性下降;

  2、加樣時留意勿觸及包被板底部,避免擦傷包被物使抗體(抗原)掉落而影響試驗(yàn)成果的精確性;

  3、洗刷不充分,會使成果假性增高,過分洗刷呈假陰性;

  4、比色時應(yīng)保持包被孔底部無異物、無水汽,特別是冬天板從37℃水浴箱取出時,底部留有水汽,應(yīng)將板底擦干后進(jìn)行比色,水汽或孔內(nèi)氣泡也會使OD值升高;

  5、抗原與抗體反響達(dá)到平衡,依賴于溫度與時刻。溫度高于45℃易引起失活及符號物掉落,溫度低于4℃,影響反響速度。

  總歸,由于ELISA試劑盒試驗(yàn)的影響要素較多,在實(shí)踐工作中必須操作規(guī)范、仔細(xì),避免和排除各種要素的影響,使之得到精確可靠的查驗(yàn)成果。

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