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如何選擇合適的細(xì)胞培養(yǎng)板?
更新時間:2019-09-06瀏覽:1585次

  如何選擇?細(xì)胞培養(yǎng)的規(guī)??纱罂尚?,你既可以使用生物反應(yīng)器,也可以使用培養(yǎng)瓶或多孔板。如今,利用多孔板的細(xì)胞培養(yǎng)模式正倍受青睞,因?yàn)檫@有助于研究多個動態(tài)變量,減少實(shí)驗(yàn)時間,并節(jié)約昂貴的試劑。除了標(biāo)準(zhǔn)的高通量微孔板,還有一些特殊的微孔板被開發(fā)出來,助力3D和器官型細(xì)胞培養(yǎng)。

  市場上的細(xì)胞培養(yǎng)板可不少,如何選擇合適的呢?我們需要重點(diǎn)考慮孔的數(shù)量、孔的形狀、微孔板顏色以及表面處理。

  1. 孔的數(shù)量

  大多數(shù)用戶在組織培養(yǎng)瓶上開始組織培養(yǎng)。不過,許多應(yīng)用也需要多孔板。理想的數(shù)量嘛,取決于你所需的通量水平,以及是否有機(jī)器人的協(xié)助。*手動地向96孔板中添加試劑,這并非不可行,但有電動移液器或機(jī)器人的幫助當(dāng)然更好。擴(kuò)展到384孔板,就更加需要機(jī)器人,而1536孔板更是需要。當(dāng)然,高密度多孔板的挑戰(zhàn)還在于分析小型化。

  2. 孔的形狀

  孔的底部可以選擇平的、圓的,或錐形的,這取決于細(xì)胞類型和下游應(yīng)用。對于傳統(tǒng)的2D細(xì)胞培養(yǎng)(如HeLa或MDCK細(xì)胞),特別是需要對培養(yǎng)物進(jìn)行成像或分光光度測定,通常平底(F-bottom)。對于不存在接觸抑制的細(xì)胞,弧形底(C-bottom)也不錯。圓底(U-bottom)適合懸浮培養(yǎng)(如球體細(xì)胞培養(yǎng)),因?yàn)閳A的表面讓細(xì)胞難以附著和生長。而錐形底很少用于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),但在細(xì)胞沉淀時可能有用。

  3. 微孔板的顏色

  多孔板的顏色也與應(yīng)用息息相關(guān)。如果用相差顯微鏡或肉眼觀察細(xì)胞,可選擇透明的多孔板。不過,對于可見光光譜以外的應(yīng)用(如冷光或熒光),有顏色的多孔板(如白色或黑色)則是必需的。在使用從頂部讀數(shù)的儀器時,底部應(yīng)該是不透明的,而使用顯微鏡或底部讀數(shù)的儀器時,應(yīng)選擇底部透明的多孔板。冷光樣品通常選擇白色表面,以便大限度提高信號的反射率,而大于300 nm的熒光應(yīng)用通常使用黑色表面,以吸收激發(fā)信號。有顏色的表面還可以防止相鄰孔之間的信號串?dāng)_。

  4. 表面處理

  選擇哪種細(xì)胞表面處理,這要取決于你培養(yǎng)的是懸浮細(xì)胞還是貼壁細(xì)胞。對于懸浮或球體細(xì)胞培養(yǎng),建議使用BRAND inertGrade™微孔板,它經(jīng)過一定的疏水凝膠處理,可抑制細(xì)胞或蛋白附著。對于輕松附著的貼壁細(xì)胞(如HeLa),標(biāo)準(zhǔn)的組織培養(yǎng)表面就足夠了。對于那些貼壁有困難的細(xì)胞(如原代細(xì)胞),或涉及到嚴(yán)格洗滌的應(yīng)用,建議使用BRAND的cellGrade™微孔板。這種*的表面與多聚賴氨酸處理的表面相似,但它不是涂層,而是塑料性質(zhì)的物理變化,因此不需要冷藏。對于那些敏感細(xì)胞或血清量減少的細(xì)胞,建議使用cellGrade™ plus表面。

  后,當(dāng)然不能忽視培養(yǎng)容器的質(zhì)量。這不僅僅指微孔板,還包括與細(xì)胞接觸的一切,比如吸頭,以避免細(xì)胞污染或死亡。

 

  注:資料僅供參考,謝謝!

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